Se realizó un estudio observacional, retrospectivo, descriptivo, longitudinal de las Infecciones Nosocomiales en los servicios del Hospital Universitario "Vladimir Ilich Lenin" en Holguín en el periodo comprendido entre enero de 2005 y diciembre de 2009, con un universo y muestra de trabajo de 5 485 pacientes, con el objetivo de identificar el comportamiento de las IIH. Se revisaron los libros de registro de Infecciones Nosocomiales del Laboratorio de Microbiología del Hospital, el registro de IIH del Departamento de Epidemiología y los expedientes clínicos. Se analizaron, además, los resultados bacteriológicos correspondientes a los aislamientos del control de las infecciones hospitalarias reflejadas en los registros microbiológicos. El servicio que reportó mayor número de casos fue la Unidad de Cuidados Progresivos, mientras que la bacteria aislada con mayor frecuencia como agente causal de estos cuadros de infección en este hospital resultó Staphylococcus aureus, aunque del total de los aislamientos las bacterias gramnegativas prevalecieron sobre las grampositivas. En cuanto a la resistencia de los microorganismos frente a los antimicrobianos en el caso de Staphylococcus aureus se observó resistencia a la Penicilina, a la Amikacina, al Ampicillín y al Oxacillín en un 100% de los casos, mientras que para las bacterias gramnegativas la mayor resistencia fue a la Amikacina. Se encontró una tendencia ascendente de las IIH en el Hospital Vladimir Ilich Lenin.