Se realizó un estudio experimental con el objetivo de identificar las cepas de leptospiras aisladas localmente para ser empleadas en la prueba de microaglutinación y apreciar su comportamiento serológico frente a las cepas de referencia. La muestra estuvo constituida por 60 sueros de pacientes presuntivos de leptospirosis por el cuadro clínico y los antecedentes epidemiológicos que presentaron, procedentes de distintas unidades de salud de la provincia de Holguín; 40 sueros resultaron reactores a la Hemaglutinación pasiva (HA). Se realizó la identificación de 34 cepas provenientes de hemocultivos con aislamientos de leptospiras del período del 2004 al 2007, en el Instituto de Investigación y Producción de vacunas ¨Carlos J. Finlay¨, utilizando antisueros policlonales para la identificación en serogrupos y anticuerpos monoclonales en serovar, conformándose cinco cepas representantes de los serovares: Ballum Ballum, Canicola Canicola, Pomona Pomona, Hebdomadis Wolffi e Icterohaemorrhagiae Copenhageni como las de mayor circulación en la región. A las muestras de sueros se les realizó la microaglutinación con las cepas aisladas localmente y las de referencia de forma paralela. Los resultados mostraron mayor reactividad con las cepas locales que con las de referencia sin que existiera diferencia significativa. Se encontró concordancia de un 86,3% en la reactividad e incremento de los títulos de anticuerpos de los sueros reactores usando cepas locales, el promedio de reacciones cruzadas disminuyeron cuando se utilizaron las cepas locales y se demostró su utilidad en la evaluación de estudios inmunológicos.